(Flow cytometry , FCM ) هڪ سيل تجزيه ڪندڙ آهي جيڪو داغ ٿيل سيل مارڪرز جي فلورسنس شدت کي ماپ ڪري ٿو. اها هڪ اعليٰ ٽيڪنالاجي آهي جيڪا اڪيلي سيلز جي تجزيو ۽ ترتيب جي بنياد تي ٺاهي وئي آهي. اهو تيزيءَ سان ماپ ۽ درجه بندي ڪري سگهي ٿو سائيز، اندروني ڍانچي، ڊي اين اي، آر اين اي، پروٽين، اينٽيجنز ۽ سيلز جي ٻين جسماني يا ڪيميائي ملڪيتن کي، ۽ انهن طبقن جي مجموعن جي بنياد تي ڪري سگهجي ٿو.
فلو cytometer بنيادي طور تي هيٺين پنج حصن تي مشتمل آهي:
1 فلو چيمبر ۽ فلوڊيڪس سسٽم
2 ليزر لائيٽ جو ذريعو ۽ بيم جي شڪل ڏيڻ وارو نظام
3 بصري نظام
4 اليڪٽرانڪس، اسٽوريج، ڊسپلي ۽ تجزيو سسٽم
5 سيل ترتيب ڏيڻ وارو نظام
انهن مان، ليزر جي روشني جو ذريعو ۽ بيم ٺاهڻ واري نظام ۾ ليزر جوش، فلو سائٽوميٽري ۾ فلورسنس سگنلن جي مکيه ماپ آهي. جوش جي روشني جي شدت ۽ نمائش جو وقت فلورسنس سگنل جي شدت سان لاڳاپيل آهي. ليزر هڪ مربوط روشني جو ذريعو آهي جيڪو هڪ واحد طول موج، تيز شدت، ۽ اعلي استحڪام جي روشني مهيا ڪري سگهي ٿو. انهن ضرورتن کي پورو ڪرڻ لاءِ اهو مثالي جوش جي روشني جو ذريعو آهي.
ليزر ماخذ ۽ فلو چيمبر جي وچ ۾ ٻه سلنڊر لينس آهن. اهي لينس هڪ ليزر شعاع کي هڪ سرڪلر ڪراس-سيڪشن سان فوڪس ڪن ٿا جيڪي ليزر ذريعن مان نڪرندڙ هڪ elliptical شعاع ۾ هڪ ننڍي ڪراس-سيڪشن سان (22 μm × 66 μm) آهن. هن elliptical شعاع جي اندر ليزر توانائي هڪ عام تقسيم جي مطابق ورهايو ويندو آهي، ليزر ڳولڻ واري علائقي مان گذري سيلز لاء مسلسل روشني جي شدت کي يقيني بڻائي ٿي. ٻئي طرف، آپٽيڪل سسٽم ڪيترن ئي سيٽن تي مشتمل آهي لينس، پن هول ۽ فلٽر، جن کي تقريبن ٻن گروپن ۾ ورهائي سگهجي ٿو: فلو چيمبر جي اپ اسٽريم ۽ هيٺيون وهڪرو.
فلو چيمبر جي سامهون آپٽيڪل سسٽم هڪ لينس ۽ پن هول تي مشتمل آهي. لينس ۽ پن هول جو بنيادي ڪم (عام طور تي ٻه لينس ۽ هڪ پن هول) ليزر بيم کي هڪ گول ڪراس-سيڪشن سان فوڪس ڪرڻ آهي جيڪو ليزر ذريعي خارج ڪيو ويو آهي هڪ elliptical شعاع ۾ هڪ ننڍي ڪراس-سيڪشن سان. هي ليزر توانائي کي عام تقسيم جي مطابق ورهائي ٿو، ليزر جي چڪاس واري علائقي ۾ سيلز لاء مسلسل روشني جي شدت کي يقيني بڻائي ۽ گمراهه روشني کان مداخلت کي گھٽائي.
فلٽر جا ٽي مکيه قسم آهن:
1: لانگ پاس فلٽر (LPF) - صرف روشني کي اجازت ڏئي ٿو موج جي ڊيگهه سان گڏ هڪ مخصوص قدر کان وڌيڪ گذري وڃڻ جي.
2: شارٽ-پاس فلٽر (SPF) - صرف روشني کي اجازت ڏئي ٿو ته روشنيءَ کي هڪ مخصوص قدر هيٺان ويجهڙائيءَ سان گذري وڃي.
3: بينڊ پاس فلٽر (BPF) - صرف روشني کي اجازت ڏئي ٿو هڪ مخصوص موج جي ڊيگهه جي حد مان گذري ٿو.
فلٽرن جا مختلف مجموعا انفرادي فوٽو ملٽيپليئر ٽيوبز (PMTs) ڏانهن مختلف موج جي ڊيگهه تي فلورسنس سگنلز کي سڌو ڪري سگهن ٿا. مثال طور، پي ايم ٽي جي سامهون سائي فلورسنس (FITC) کي ڳولڻ لاء فلٽر LPF550 ۽ BPF525 آهن. PMT جي سامهون نارنگي-لال فلورسنس (PE) کي ڳولڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ فلٽر LPF600 ۽ BPF575 آهن. PMT جي سامهون ڳاڙهي فلورسنس (CY5) کي ڳولڻ لاء فلٽر LPF650 ۽ BPF675 آهن.
فلو cytometry بنيادي طور سيل جي ترتيب لاء استعمال ڪيو ويندو آهي. ڪمپيوٽر ٽيڪنالاجي جي ترقي سان، امونالوجي جي ترقي ۽ مونوڪلونل اينٽي باڊي ٽيڪنالاجي جي ايجاد، حياتيات، دوائون، فارميسي ۽ ٻين شعبن ۾ ان جي ايپليڪيشنن تيزي سان وسيع ٿي رهيا آهن. انهن ايپليڪيشنن ۾ سيل ڊينامڪس تجزيا، سيل اپوپٽوسس، سيل ٽائپنگ، ٽيومر جي تشخيص، دوا جي افاديت جو تجزيو، وغيره شامل آهن.
پوسٽ جو وقت: سيپٽمبر-21-2023
